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CY7-磷酸吡哆醛 CY7-PLP 荧光标记磷酸吡哆醛
文章来源 : 齐岳生物
作者:小编zyl
发布时间 : 2026-02-04 14:18:19
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产品名称:CY7-磷酸吡哆醛 CY7-PLP 荧光标记磷酸吡哆醛
产品描述:
CY7-磷酸吡哆醛 CY7-PLP 荧光标记磷酸吡哆醛
一、产品概述
CY7-磷酸吡哆醛(CY7-Pyridoxal Phosphate,CY7-PLP) 是一种将近红光荧光染料 Cyanine7(CY7) 与生物活性辅酶 磷酸吡哆醛(PLP, Pyridoxal 5’-Phosphate) 通过稳定共价连接构建的功能化小分子探针。该产品将 PLP 的酶辅因子功能与 CY7 的高灵敏荧光信号整合在同一分子中,形成了一种可用于 酶动力学、底物结合及活性调控研究的可视化工具。
磷酸吡哆醛是多种依赖 PLP 的酶(如转氨酶、脱羧酶、半胱氨酸合成酶等)的关键辅因子,通过其醛基与酶的赖氨酸残基形成可逆的席夫碱(Schiff Base),调控酶催化过程。将 CY7 标记到 PLP 分子上,使其在参与酶反应时产生可检测的荧光信号,为酶动力学、活性位点分析和底物相互作用研究提供了直接、灵敏的手段。
二、分子设计与构建原理
1. CY7 荧光染料特性
CY7 是一种成熟的近红外荧光染料,具有以下光学优势:
大激发波长(Ex):约 730–750 nm
大发射波长(Em):约 770–790 nm
光谱远离生物体系自发荧光区域,信噪比高
高光稳定性,可支持连续监测及动力学分析
CY7 的分子结构具有活性官能团(如 NHS 酯、羧基等),可与磷酸吡哆醛分子定向偶联,保证荧光性能不受破坏。
2. 磷酸吡哆醛生物学功能
PLP 分子结构包含:
醛基(-CHO):与酶赖氨酸残基形成可逆席夫碱
磷酸基团:赋予水溶性和酶结合亲和性
吡哆环:维持酶活性和底物识别能力
标记 CY7 后,醛基和磷酸基结构保留,可继续参与酶催化反应,使荧光信号直接反映酶-辅因子相互作用和底物结合状态。
3. 分子偶联机制
CY7-PLP 的合成通常采用 CY7-NHS 酯与 PLP 的氨基或羟基进行酰胺或酯键偶联:
CY7-NHS 酯中的碳酰中心被 PLP 官能团亲核攻击
形成稳定共价键,释放 NHS 基团
保留 PLP 的活性结构与酶结合位点
该设计保证了荧光可检测性与生物功能完整性的高度兼容。
三、物理化学特性
水溶性与操作兼容性
CY7-PLP 可溶于常用缓冲体系(PBS、HEPES、Tris),适合体外酶动力学实验及微量分析。
光学性能稳定
激发与发射波长适合近红外检测
光漂白低,可进行长时间动力学追踪
分子稳定性
酰胺或酯键稳定
酶动力学实验条件下结构完整性高
可耐受多步实验操作及储存
四、酶动力学研究中的功能优势
1. 实时监测酶-辅因子结合
CY7-PLP 可通过荧光强度或光谱变化反映 PLP 与靶酶结合情况,实现非标记底物或酶的直接动力学追踪。
2. 可定量分析底物与受体相互作用
通过调节 CY7-PLP 浓度,可获得:
结合常数(Kd)
酶动力学参数(Km、Vmax)
竞争结合实验结果
为酶活性调控、底物特异性研究提供可靠数据。
3. 灵敏的信号输出
CY7 的近红外信号可避开蛋白质及细胞自发荧光,实现低背景、高灵敏度检测。
4. 高通量与模块化实验设计
CY7-PLP 可与微孔板、芯片或荧光显微成像体系结合,实现多样化、高通量实验平台的开发。
五、主要应用方向
酶动力学分析
PLP 依赖酶的结合与活性研究
转氨酶、脱羧酶及相关辅酶反应监控
辅因子-受体互作研究
通过荧光信号分析酶-辅因子结合亲和力
竞争实验及抑制剂筛选
药物筛选与酶调控研究
药物或化合物对 PLP 依赖酶的影响分析
高通量抑制剂或激活剂筛选
活细胞及组织研究
通过 CY7 近红外信号实现细胞内 PLP 依赖酶活性成像
荧光动力学追踪辅因子分布与代谢路径
六、实验使用与储存建议
干粉保存:-20 ℃,避光
溶液储存:4 ℃,避光
避免反复冻融,以保持荧光强度和分子活性
典型实验起始浓度:0.1–10 μM,根据酶体系优化
七、产品优势总结
荧光信号与生物功能兼容:CY7 提供灵敏荧光,PLP 保留酶辅因子活性
结构稳定:酰胺或酯键保证长期储存与多步实验可靠性
高灵敏、高特异:适合酶动力学研究与底物-辅因子相互作用分析
应用范围广:体外酶分析、高通量筛选、活细胞成像等
CY7-磷酸吡哆醛(CY7-PLP) 将酶辅因子功能与红外荧光检测整合,为 PLP 依赖酶动力学、辅因子结合研究及分子机制解析提供了高灵敏、可重复、??榛氖笛楣ぞ?,是生命科学及药物研发领域的理想科研试剂。
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